ارزیابی کینتیکی آنزیم نیتریک اکسید سنتاز استخراج شده از کلیه گوسفند

Authors

  • آبرومند, محمد
  • خیراله, علیرضا
  • ملک عسکر, علی محمد
  • کدخدایی الیادرانی, منیژه
Abstract:

Background and purpose: Nitric oxide (NO) is produced by nitric oxide synthase (NOS) from L-arginine and has an important role in a variety of physiological and pathological processes in biological systems. In this study, kinetic activities of isolated NOS were evaluated from sheep kidney. Materials and methods: In this reasearch homogenization, ammonium sulfate precipitation and column chromatography on DEAE-32 Cellulose and 2', 5'-ADP-agarose of 500 grams of sheep kidney were used to purify isolated nitric oxide. In all steps of purification process the amount of protein and its activity was assayed using Bradford and Griess reactions. Results: The molecular weight of sheep kidney on SDS-PAGE electrophoresis was 54 KD. Specific activity was 0.6 units/mg protein and recovery of purification was 0.9% (relative purity was 20 times more). Optimum temperature and pH were 30˚C and 7.4 and incubation of purified enzyme at thermal interval of 10 to 30˚C for 15 minute showed a stable enzyme activity. At 75 μM concentration of L-arginine substrate, the highest level of NOS activity was seen. The Vmax and Km of enzyme were 250 nmol/min/mg protein and 5.32 M, respectively. Conclusion: NOS enzyme from sheep kidney was purified with relative purity of 20 times and their optimum temperature, pH, suitable substrate concentration, Vmax and Km were 30˚C, 7.4, 75 μM, 250 nmol/min/mg proteins and 5.32 µmol, respectively.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

اثرحمایتی تمرین هوازی در مقابل برخی از شاخص های پیش التهابی ناشی از مهار مزمن نیتریک اکسید سنتاز در بافت کلیه موش های صحرایی

سابقه و هدف: پرفشارخونی با تغییر عملکرد اندوتلیالی حاصل از کاهش فراهمی نیتریک اکسید و آسیب کلیوی همراه است. بهبود عملکرد اندوتلیالی با تمرین ورزشی در مدل های پرفشارخونی حیوانی و بیماران مبتلا به پرفشارخونی مشاهده شد. هدف از این تحقیق بررسی اثر حمایتی تمرین هوازی در مقابل برخی از سایتوکاین های پیش التهابی بافت کلیه موش های تیمار شده با مهار مزمن نیتریک اکسید سنتاز می باشد. مواد و روشها: در این ...

full text

ارتباط چند شکلی‌های ژن نیتریک اکسید سنتاز اندوتلیالی با سندرم سقط مکرر

سابقه و هدف: سقط مکرر به معنی از دست دادن سه یا بیش از سه بارداری قبل از هفته بیستم حاملگی است که حدود 1 تا 5% زنان باردار را تحت تأثیر قرار می‏دهد. نیتریک اکسید سنتاز اندوتلیالی (eNOS) آنزیمی است که در طی بارداری روی گنادوتروپین جنینی اثر می‏گذارد. مطالعات قبلی وابستگی بین فعالیت eNOS و بارداری را نشان داده است، اما امروزه ارتباط بین چند شکلی‏های این ژن و سندرم سقط مکرر اختلاف نظر وجود دارد. د...

full text

فعالیت آنتی‏ اکسیدانی و اثر اسانس زنیان بر بیان آنزیم نیتریک اکسید سنتاز در ماکروفاژ موشی

زنیان با نام علمی carum copticum گیاهی از خانواده‏ی چتریان می باشد که دارای خواص درمانی متفاوتی از جمله خواص ضد درد، ضد نفخ، ضد اسپاسم، ضد سرفه، خلط‏آور و ضد فشارخون بالا است. علاوه بر این، این گیاه در صنایع دارویی و غذایی کاربردهای گسترده ای دارد. مهم ترین بخش از گیاه که دارای خواص دارویی می باشد اسانس میوه‏ی آن است. آنالیز گاز کروماتوگرافی- طیف سنجی جرمی اسانس میوه‏ی زنیان نشان داد که اسانس ع...

15 صفحه اول

فعالیت آنتی اکسیدانی و اثر اسانس آنغوزه بر بیان آنزیم نیتریک اکسید سنتاز در ماکروفاژ موشی

آنغوزه با نام علمیferula assafoetida گیاهی متعلق به تیره چتریان و دارای خواص درمانی سنتی از جمله ضد نفخ ، ضد انگل، ضدانقباض، ضد تشنج، ادرار آور،کرم زدا، داروی مسکن است. این گیاه در صنایع دارویی و غذایی کاربرد‎های وسیعی دارد. از مهمترین اجزای تشکیل دهنده این گیاه که امروزه کاربرد وسیعی در صنایع دارویی پیدا کرده اسانس این گیاه است. آنالیز گاز کروماتوگرافی نشان داد که اسانس آنغوزه از ترکیبات عمده ...

15 صفحه اول

تعیین میزان فعالیت و بیان کمی آنزیم نیتریک اکسید سنتاز اندوتلیالی (enos) در پلاکت های بیماران قلبی-عروقی آنژیوگرافی شده

در میان مدیاتورهایی که توسط اندوتلیوم آزاد می شوند، نیتریک اکسید بسیار مهم می باشد. آنزیم های مسئول سنتز نیتریک اکسید، نیتریک اکسید سنتازها هستند. تاکنون سه ایزوفرم اندوتلیالی، نورونی و القایی ازاین آنزیم شناخته شده است. ایزوفرم اندوتلیالی این آنزیم علاوه بر سلول های اندوتلیالی در پلاکت ها نیز بیان می شود و نقش مهمی در سیستم قلبی- عروقی ایفا می کند. نیتریک اکسید تولید شده ازاین ایزوفرم در کنترل...

15 صفحه اول

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 22  issue 96

pages  59- 69

publication date 2013-01

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Keywords

No Keywords

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023